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原位杂交(ISH)技术服务

原理:

原位杂交组织(或细胞)化学 (In situ Hybridization Histochemistry,ISHH) 简称原位杂交(In Situ Hybridization),属于固相分子杂交的范畴,它是用标记的DNA或RNA为探针,在原位检测组织细胞内特定核酸序列的方法。根据所用探针和靶核酸的不同,原位杂交可分为DNA-DNA杂交,DNA-RNA杂交和RNA-RNA杂交三类。

实验步骤:

1、玻片处理;

2、组织处理;

3、切片处理;

4、灭活;

5、暴露 mRNA 核酸片段(消化);

6、预杂交;

7、杂交;

8、杂交后洗涤;

9、封闭;

10、加生物素化鼠抗地高辛;

11、SABC显色;

12、滴加生物素化过氧化物酶;

13、DAB 显色;

14、复染;

注意事项:

1、组织取材应尽可能新鲜。由于组织RNA降解较快,所以新鲜组织和培养细胞最好在30 min 内固定。

2、固定时间越长,mRNA破坏的越多;做原位杂交组织固定时间不宜过长,一般24h。

3、在整个杂交前处理过程都需戴消毒手套,避免RNA污染。

实验结果及数据:

收到标本后15-20个工作日之内将作好的片子交于客户。

基本收费:

70 元/张

做2-3张预实验片

注:客户提供蜡块或者切片及原位杂交试剂盒,公司也代购试剂盒