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免疫印迹(Western-blot)技术服务

原理:

免疫印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(Western blotting),是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。由于免疫印迹具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性,可检测低至1-5ng(最低可到10-100pg)中等大小的靶蛋白,现已成为蛋白分析的一种常规技术。免疫印迹常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析。

应用:

1、目的蛋白表达定性及半定量分析

2、目的蛋白表达变化分析

3、不同样品同种蛋白表达差异分析

免疫印迹实验流程:

1、细胞及组织蛋白质抽提;

2、蛋白质定量;

3、SDS-PAGE)电泳;

4、蛋白质转印至NC或PVDF膜;

5、膜封闭及抗体孵育;

6、化学发光法检测,X胶片曝光显影;

7、数据分析;

8、提供实验报告:详细的实验方法及实验结果。

实验要求:

1. 自备一抗,一抗为进口单克隆抗体,本公司可代为购买一抗。

2. 标本尽可能新鲜;标本量:质量大于100mg;细胞数大于1×106。

标本收集

组织样品:

采集新鲜组织,离体时间尽量不超过15分钟,用锡箔纸包埋或者放入冻存管中,先放入液氮中速冻几个小时或者过夜,再放入-80度冰箱或液氮保存。

细胞样品:

低速离心收集细胞,弃去PBS,放入液氮中速冻,然后转入-80度冰箱保存。

实验结果及数据:

1、 收到标本后20-30个工作日之内提交实验结果,具体包括实验方法、步骤、所用试剂、仪器、图片及相关分析数据。

2、为了尽可能节省客户时间和标本,服务不设预实验,取标本前会与客户进行充分沟通,听取建议及提出要求,正式实验一遍后将与客户沟通是否需要再次实验,实验按结果收费。

基本收费:

1000 元/张膜(8个样,一个抗体),内参免费

注:样本处理另行收费,特殊要求费用需协商。